本制品是利用Real Time PCR技術(shù)快速鑒定肉及肉制品種屬的聯(lián)合檢測試劑盒。根據動(dòng)物基因種間多態(tài)性的差異設計各物種特異性的引物，并將反應條件優(yōu)化到同一體系，即可以在一個(gè)PCR 體系中同時(shí)對多個(gè)物種成分進(jìn)行鑒定。本檢測無(wú)需電泳，簡(jiǎn)單快速，靈敏度高、特異性強，并可以根據需要靈活組合鑒定的肉制品種類(lèi)和檢測樣本的份數。 

試劑盒成份

8聯(lián)管檢測特異性布局（8連管自備） 

產(chǎn)品規格 

40次/盒

儲存條件  

-20℃避光保存，有效期6個(gè)月。

DNA樣品制備

 使用專(zhuān)用的組織DNA提取試劑盒提取樣本的DNA（自備，推薦使用OMEGA組織DNA提取試劑盒）。 

實(shí)驗操作步驟

  1、實(shí)驗準備：取出試劑于冰上解凍，解凍后簡(jiǎn)短離心。根據需檢測的樣本數取出8聯(lián)管，每條8聯(lián)管對應一個(gè)樣本。

 2、加樣：按照8連管特異性布局每管各加入1ul對應的引物mix，10ul酶反應混合液和8ul的ddH2O，然后1-7孔依次加入1ul提取的待檢DNA樣本（約50ng左右），第8孔加入1ul陰性對照，加完樣本DNA后，蓋好管蓋，簡(jiǎn)短離心，放入PCR儀中。

3、PCR反應條件：總反應時(shí)間約120分鐘。

   95℃      5m in

   95℃       15s

   60℃       40s     35個(gè)循環(huán)

   72℃       45s

   60℃        15s     溶解曲線(xiàn)

   95℃        15s

 4、結果分析：反應結束后，檢查擴增曲線(xiàn)和溶解曲線(xiàn)是否正常，是否需要調整基線(xiàn)。待調整好曲線(xiàn)后讀取擴增曲線(xiàn)的CT值。

5、結果判定：陰性對照孔為陰性（無(wú)CT值），試驗孔無(wú)CT值的直接判讀為陰性；有擴增CT值的與內參孔擴增CT值進(jìn)行比較，試驗孔CT值減去內參孔CT值大于7的判讀為陰性，小于等于7的判讀為陽(yáng)性；若陰性對照孔有CT值，且有明顯的擴增曲線(xiàn)時(shí)結果無(wú)效，需重新做。

判讀舉例：由以下結果的CT值判斷，樣本1成分為豬源性成分，樣本2成分為羊源性成分。                             

 6、說(shuō)明：本試劑盒在正常檢測情況下不必設立陽(yáng)性對照，各孔檢測CT值只與內參孔進(jìn)行對照即可，最后一孔為陰性對照。當檢測結果異常，不易判定時(shí)可使用試劑盒中所帶各陽(yáng)性DNA進(jìn)行驗證。        

注意事項

1. 初次使用前請仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，并嚴格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2. 處理樣本的器械、平皿、吸頭、離心管等應高壓滅菌且不能交叉使用；

3. DNA提取時(shí)應在通風(fēng)櫥內操作，且每次提取后都要清洗通風(fēng)櫥。

4. 使用專(zhuān)用的試劑盒提取樣本DNA，保證DNA的質(zhì)量。

5. 本試劑盒僅供定性篩查用。